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Des disques pré-imprégnés d'une dose connue d'antibiotique sont déposés à la surface de la gélose. L'antibiotique diffuse à partir du disque en créant un gradient de concentration. La détermination du diamètre de la zone d'inhibition permet une estimation de la concentration minimale inhibitrice. Controle de microbiologie 2éme année biologie végétale. Les caractères de sensibilité ou de résistance de la souche bactérienne en seront déduits. IV- Matériel utilisés - Boites de Pétri - Une suspension bactérienne - Désinfectant - Bec Bunsen - Des pinces stériles - Pipettes graduées, pro-pipettes - Râteaux - Disques d'antibiotiques à tester (la pénicilline G, l'ampicilline, Tétracycline, l'Acide Nalidixique) V- Protocole expérimentale Nettoyer la paillasse avec le désinfectant afin de minimiser les risques de contamination extérieur lors de la manipulation. Allumer le bec Bunsen afin de stériliser l'air alentour et détruire ainsi les organismes pouvant altérer les résultats. Toute la manipulation doit se faire dans un rayon de 20/25 cm autour de la flamme.

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TP N° 8: LES INHIBITEURS DE LA CROISSANCE (L'ANTIBIOGRAMME) I- Objectifs 1- Connaitre la notion de l'antibiogramme et son intérêt 2- Connaitre les notions des CMI, CMB 3- Réaliser un antibiogramme standard (méthode de diffusion) in vitro II- Définition L' antibiogramme est un examen de laboratoire visant à déterminer la sensibilité d'une bactérie à différents antibiotiques. Deux notions sont à connaître avant de faire un antibiogramme: - La CMI ou Concentration Minimale Inhibitrice. Il s'agit de la concentration de l'antibiotique la plus faible pour laquelle la croissance bactérienne est inhibée (pas de croissance de la population; 100% de survivants) - La CMB ou Concentration Minimale Bactéricide. C'est la concentration de l'antibiotique la plus faible permettant de détruire 99. 99% des bactéries présentes au départ (soit une bactérie survivante sur 10000). Si CMB < 5 CMI l'antibiotique est très efficace. Sujets de partiels et d'examens pour la Licence de biologie - Des sujets de partiels, d'examens pour réviser la biologie enseignée en Licence de biologie.. Au contraire si CMB > 10 CMI, on le considère peu efficace. III- Principe général Pour réaliser l'antibiogramme par le méthode des disques, la culture bactérienne est ensemencée à la surface d'une gélose spécialement étudiée, la gélose de Mueller-Hinton, éventuellement additionnée de sang.

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Il n'est pas aisé de définir ce qu'est la biologie... Au sens strict, il s'agit de la science du vivant. La difficulté réside dans la détermination de ce qui est vivant, et de ce qui ne l'est pas... eBiologie te permettra d'éclaircir ce concept. Révise tes cours, entraîne-toi régulièrement et deviens incollable!

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Cette standardisation est effectuée par les fabricants et le laboratoire a pour unique responsabilité de stocker les disques dans des conditions optimales et de ne pas utiliser des disques périmés. Avant utilisation, les disques doivent être amenés à température ambiante. Toute cartouche ouverte doit être utilisée dans les cinq jours. La densité de l'inoculum bactérien est un élément primordial et elle doit être ajustée à l'aide d'un photomètre ou par comparaison avec un étalon d'opacité (échelle de McFarland). Une phase de pré-diffusion des antibiotiques peut conduire à l'obtention de zones d'inhibition plus importantes. Selon les pays, une pré-diffusion est ou non préconisée. QCM corrigés - Exercices de biologie, sur eBiologie.fr. En France, la technique du "Comité de l'Antibiogramme de la SFM" ne prévoit pas de pré- diffusion La température et la durée d'incubation doivent être fixes. Pour la majorité des bactéries l'incubation est effectuée à 35-37 °C durant 18-24 heures dans une atmosphère normale La technique doit être régulièrement contrôlée avec des souches de référence

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