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En matière de microscopie, on distingue principalement trois familles techniques: la microscopie optique, la microscopie à sonde locale, et la microscopie électronique. Cette dernière méthode que nous allons voir ensemble est utilisée principalement pour l'observation d'échantillons biologiques, ou d'échantillons industriels dans des secteurs comme la métallurgie et l'industrie des semi-conducteurs. Qu'est ce qu'un Microscope Électronique à Balayage (MEB)? Contrairement à la microscopie optique, le MEB n'utilise pas la lumière naturelle (soleil ou autre source lumineuse), mais un faisceau d'électrons focalisé qui excite la surface de la cible à inspecter. Ce faisceau, émis par un canon à électrons, est focalisé à l'aide de bobines électromagnétiques appelées également lentilles. En entrant en collision avec l'échantillon analysé, le faisceau va générer deux types de réponses: Génération d'électrons secondaires: Les atomes de l'échantillon excités par le faisceau primaire vont libérer des électrons périphé derniers vont fournir un renseignement précis sur la topographie de la cible Des électrons rétrodiffusés: Les électrons du faisceau primaire vont venir rebondir sur la cible.

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Le microscope électronique à balayage est un équipement qui utilise des faisceaux d'électrons à haute énergie pour générer des informations sur un échantillon de microscopie. Les informations générées sont ensuite résolues en une image de l'échantillon. Les microscopes électroniques à balayage sont jusqu'à 250 fois plus puissants que les microscopes optiques et peuvent agrandir les images jusqu'à 500, 000 XNUMX fois. Un microscope électronique à balayage standard peut résoudre des images d'objets aussi petits que cinq nanomètres. Un nanomètre équivaut à un milliardième de mètre, soit environ quatre milliardièmes de pouce. Ces microscopes peuvent générer des images précises d'organismes aussi petits que des virus, et même des bactériophages, qui sont des virus qui infectent les bactéries. En plus de sa capacité à agrandir de si petits spécimens, une autre caractéristique utile du microscope électronique à balayage est qu'il peut produire des images tridimensionnelles. C'est parce que les microscopes ont une grande profondeur de champ, permettant aux objets à l'arrière-plan et au premier plan de rester focalisés simultanément.

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L'analyse des échantillons par microscopie électronique ne peut se faire sans une préparation spécifique selon la nature de l'échantillon. Cette préparation dépend également de ce qui est recherché, allant de l'analyse ultrastructurale au MET au balayage de la surface de l'échantillon au MEB. Préparation classique des échantillons destinés à l'analyse au microscope électronique à balayage (MEB) Le traitement classiquement proposé pour les échantillons biologiques consiste en une fixation au glutaraldéhyde pour préserver les tissus, un traitement à l'OsO4 pour renforcer le signal et apporter du contraste, ainsi qu'une déshydratation pour optimiser l'analyse dans une enceinte sous vide. L'échantillon est ensuite métallisé en surface à l'or palladium ce qui améliore la conductivité électrique et l'écoulement de charges. Le degré de déshydratation dépend du volume de l'échantillon. Les échantillons massifs comme les échantillons veineux ou artériels requièrent une dessication sous vide et un contournement du point critique au CO2 liquide.

Spécifications techniques de la microscopie électronique à balayage Signaux détectés: Électrons secondaires et rétrodiffusés et rayons X, lumière (cathodoluminescence) et courant induit par faisceau d'électrons (EBIC) Éléments détectés: BU (mode EDS) Limites de détection: 0. 1-1 à% Résolution de profondeur EDS Chemical: 0. 1-3 microns Imagerie / Cartographie: Oui Résolution latérale / taille de la sonde: 10 à 30 Å

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