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PasseportSanté Analyses médicales Electrophorèse des protéines plasmatiques: diagnostic et interprétation L'électrophorèse des protéines sériques est un examen effectué à partir d'une prise de sang qui permet le diagnostic et le suivi de nombreuses maladies comme une immunoglobuline monoclonale, une hypergammaglobulinémie et plus rarement une hypogammaglobulinémie. Qu'est-ce que l'électrophorèse des protéines sériques? L'électrophorèse des protéines sériques (EPS) est un examen de biologie médicale. Il a pour objectif la séparation des protéines présentes dans la partie liquide du sang (le sérum). Electrophorèse des protéines pdf 1. « Ces protéines exercent notamment un rôle de transport de nombreuses molécules (hormones, lipides, médicaments…), et interviennent également dans la coagulation, l'immunité, le maintien de la pression sanguine. Cette séparation va permettre de les identifier et de les quantifier », précise le Dr Sophie Lyon, Biologiste médical. L'analyse des protéines Après une prise de sang, les protéines sont analysées par migration dans un champ électrique.

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Le support doit être homogène, poreux et inerte. En fait, la condition d'inertie n'est jamais respectée et le support joue un rôle plus ou moins important dans la séparation. Les différents types d'électrophorèses de zones sont souvent nommés en fonction du type de support ( papier, esters de cellulose, gel, etc. ): électrophorèse sur papier; électrophorèse sur acétate de cellulose; électrophorèse sur gel ( amidon, agar, agarose, polyacrylamide, etc. Electrophorèse des protéines pdf version. ). Il existe de nombreux types d'électrophorèses, dont: focalisation isoélectrique (électrophorèse dans un gradient de pH); électrophorèse bidimensionnelle; électrophorèse en champ pulsé; immuno-électrophorèse (pour détecter une interaction antigène - anticorps). Électrophorèse sur gel [ modifier | modifier le code] En biochimie, l'électrophorèse sur gel est utilisée pour séparer les macromolécules biologiques (par exemple l' ADN) en fonction de leur taille et de leur charge électrique. Le gel est constitué d'une matrice de polymère baignant dans un tampon d'électrophorèse conducteur.

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Pour reprendre l'exemple de l'ADN, comme c'est une molécule chargée négativement, si on la met à un endroit sur le gel et qu'on fait passer un courant dans le gel, elle migre de la borne moins vers la borne plus. Au cours de cette migration, les brins d'ADN de petite taille migrent plus vite que les brins plus gros; le gel agit comme un tamis pour séparer les brins d'ADN en fonction de leur taille. Ainsi, au bout d'un certain temps de migration, les petites molécules d'ADN ont parcouru une plus grande distance que les molécules d'ADN plus grandes, qui se trouvent plus près de la position d'origine. Extraction et purification de l'ADN - TD - Meriem Gasmi. Deux principaux polymères sont utilisés: l'agarose et le polyacrylamide. On peut faire varier la concentration de polymère par rapport à celle du tampon, ainsi que son taux de réticulation. Plus le polymère est concentré et réticulé, et plus la taille des pores du gel est petite. On peut ainsi ajuster les propriétés du gel à la taille des molécules à analyser [ 1]. Électrophorèse sur gel d'agarose: l'agarose est utilisé à des concentrations de 0, 5% à 2% (masse/volume) et permet de séparer des molécules de très grande taille, principalement de l' ADN ou de l' ARN; Électrophorèse sur gel de polyacrylamide (ou PAGE pour Poly-Acrylamide Gel Electrophoresis): le polyacrylamide est utilisé à des concentrations de 4% à 20% (masse/volume) et permet de séparer des molécules plus petites: protéines, peptides et des fragments d'acides nucléiques.

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Technicienne utilisant l'électrophorèse pour séparer des protéines. Électrophorégramme d'ADN résultant d'une électrophorèse sur gel. Dans la première bande à gauche, un ADN avec des tailles de fragments connues est utilisé comme référence. Les autres bandes indiquent différentes tailles de fragments (les plus petites se déplacent le plus rapidement). Les intensités différentes indiquent des concentrations différentes (les plus brillantes indiquent le plus de fragments). L'ADN a été rendu visible à l'aide de bromure d'éthidium et de lumière ultraviolette. Electrophorèse des protéines plasmatiques [EPP]. L' électrophorèse est — avec la chromatographie — la principale des techniques utilisées en biologie pour la séparation et la caractérisation d'espèces. Elle a quelques applications en chimie, mais est principalement utilisée en biochimie ou biologie moléculaire pour la séparation des protéines ou des acides nucléiques. Dans un milieu donné, la séparation des espèces se fait en fonction de leur charge électrique et pour des charges identiques, en fonction de leur taille.

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Ceux pouvant acquérir une charge positive: La fonction guanido de l' arginine; La fonction imidazole de l' histidine; La fonction amine (-NH 2) de la lysine et de l'extrémité N-terminale de la chaîne polypeptidique. La charge nette d'une protéine dépend donc en général de sa composition en acides aminés et du pH. Électrophorèse en veine liquide [ modifier | modifier le code] Le champ électrique est fourni par un générateur de courant continu. Le support de ce champ est constitué par une solution tampon de pH et de concentration convenables dont les ions conduisent le courant d'un pôle à un autre. Electrophorèse des protéines sériques. Ce support peut être liquide: on parle alors d'électrophorèse en veine liquide (mise au point par Tiselius en 1937). Électrophorèse de zones [ modifier | modifier le code] Les principales applications utilisent un support poreux stabilisant la phase liquide: on parle alors d'électrophorèse sur support ou d'électrophorèse de zones. Le mélange à séparer est déposé sur un support convenable, poreux et imprégné de tampon.

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